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microgembio核酸提取試劑盒

 更新時間:2020-03-27 點擊量:2123

microgembio核酸提取試劑盒

 

RNA GEM是一種完整的核酸提取試劑盒,提供了一種非常簡單的方法來從單個細胞提取RNAGEM可以從中提取許多細胞類型的插圖。100,000個細胞的RNA 。該套件包含無RNase的酶,緩沖液和DNase I,非常適合處理:

 

  • 哺乳動物細胞培養
  • 激光捕獲顯微切割(LCM)

 

 

  • 熒光激活細胞分選(FACS)準備的細胞群

 

核糖核酸

 

從哺乳動物細胞培養,激光捕獲顯微切割和FACS準備的細胞群體(例如巨噬細胞)中提取RNA

適用于RT-PCR和RT-qPCR

每個試劑盒均包含RNAGEM,DNase I,BLUE緩沖液,10x DNase緩沖液和10x TE

反應數產品代碼價錢
50RTP0050$ 147.00
100RTP0100$ 280.00
500RTP0500$ 1,330.00
1000RTP1000$ 2,520.00

該圖顯示了100、500和1,000個反應試劑

 

RNA GEM是一種完整的核酸提取試劑盒,提供了一種非常簡單的方法來從單個細胞提取100,000個細胞的RNA。該試劑盒包含無RNase的酶,緩沖液和DNaseI。它能夠從哺乳動物細胞培養物,激光捕獲顯微切割和FACS制備的細胞群(例如巨噬細胞)中進行溫度控制的快速制備RNA。

  • 簡化的手動工作流程可在5分鐘內提供RT-PCR和RT-qPCR就緒的RNA
  • 在廣泛的細胞數量內以優異的線性釋放RNA和DNA
  • 無需進一步純化RNA即可進行準確的RT-PCR和RT-qPCR分析
  • 不含抑制劑意味著無需進行苛刻的化學清洗或多個步驟
  • 減少的處理可保護樣品的完整性

 

RNA提取工作流程

*,由于RNA分子的低穩定性和大量的RNase,RNA的提取是一個困難的過程。MicroGEM的RNAGEM通過極快的溫度控制的RNA提取解決了這一問題,該提取可同時裂解細胞并消除RNase。RNAGEM試劑盒高度適應各種提取體積,并可以根據細胞數量進行縮放。提取后,包括可選的DNase處理以富集RNA。RNA立即可用于下游應用,例如RT-PCR和RT-qPCR。可以將這些試劑直接添加到RNA樣品中,以進行簡單的流線型96孔板操作。

RNAGEM經過優化,可與多種不同的培養類型一起使用,包括懸浮細胞,貼壁細胞,RNAlater™中存儲的細胞,細胞沉淀以及FACS和LCM。

提取工作流程

所述RNA GEM試劑盒允許總核酸提取或根據需要的RNA的提取只是。共純化RNA和DNA的方案非常快捷,只需5分鐘即可從樣品變為核酸。單獨的RNA可以通過添加DNase(試劑盒提供)進行純化,這又會增加10分鐘的操作時間。該圖總結了共純化和RNA提取工作流程。

RNA GEM與聚合酶和逆轉錄酶兼容,提取物無需純化即可用于PCR,RT-PCR,qPCR和RT-qPCR。這導致在廣泛的細胞數目范圍內更高的靈敏度和線性度。

將HeLa細胞中的5 µl RNA GEM提取物直接添加到RT-qPCR中后,獲得此處的圖  。RNA GEM提取的細胞數量為10 – 50,000,  并從高豐度mRNA(ACTB;ß-actin)和低豐度mRNA(BRCA1;乳腺癌早期發作)生成圖。梯度類似于標準品的干凈痕跡表明沒有抑制作用,從少至10個細胞中獲得的圖表明了該方法的靈敏度。

從一系列10-50,000個細胞的HeLa細胞稀釋液中提取的RNA的RT-qPCR圖。A:高拷貝數mRNA(ACTB)B:低拷貝數mRNA(BRCA1)。紅色=標準;藍色=重復的mRNA曲線。

使用推薦的方法,RNA GEM提取的效率在  1到大約100,000個細胞的范圍內是恒定的,并具有出色的產量(請參閱下文)。相反,TRIzol®提取會損失低豐度細胞的mRNA。這意味著可以通過簡單的非DNase處理的提取物中gDNA的qPCR獲得樣品歸一化。

 

 

 

 

 

 

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